大腸桿菌發(fā)酵經(jīng)驗總結(jié)及注意事項

首先，補料速率與比生長速率直接影響著乙酸的生成速率和積累量（主要是補料速率與比生長速率影響發(fā)酵液中的殘?zhí)橇?，進而影響），所以適當?shù)目刂蒲a料速率和比生長速率，對于控制乙酸的量有很好的效果。

其次，必須要保證充足的溶氧，并嚴格控制pH值，而且補酸堿的速率盡量緩和，不能太快；溫度對于蛋白的表達也有很重要的影響，較低的發(fā)酵溫度下所生產(chǎn)出的蛋白大多是有活性的，而較高的發(fā)酵溫度下產(chǎn)生的蛋白大多一包涵體形式存在。

第三，選取合理的誘導(dǎo)時間非常重要，一般的誘導(dǎo)時間選在指數(shù)生長后期，而且誘導(dǎo)時的比生長速率最好能控制在0.2之內(nèi)，選在此時誘導(dǎo)，1.將菌體的快速生長期與蛋白合成期分開，使這兩個階段互不影響，有利于蛋白的高表達；2.已經(jīng)得到了大量的菌體，而且菌體的生物量基本接近穩(wěn)定，不論是從動力學(xué)角度，還是能耗，物料成本方面，都比較合理。

第四，補料過程中的碳氮比也很重要。若氮源過高，會使菌體生長過于旺盛，pH偏高，不利于代謝產(chǎn)物的積累，氮源不足，則菌體繁殖量少從而影響產(chǎn)量；碳源過多，則容易刑場較低的pH，抑制菌體生長，碳源不足，則容易引起菌體的衰老和自溶。另外，碳氮比不當還會引起菌體按比例的吸收營養(yǎng)物質(zhì)，從而直接影響菌體的生長和產(chǎn)物的合成。
根據(jù)自己的經(jīng)驗，一般情況下，對于一個穩(wěn)定的發(fā)酵工藝下，如果總是在固定的發(fā)酵時間段出現(xiàn)溶菌現(xiàn)象，而且能排除噬菌體和染菌的可能性后，那就可能是因為碳氮比不合理造成的?？梢赃m當調(diào)整碳氮比。